← Артқа
Г. Тұщы су жасыл микробалдырларына арналған орталар
MLAMLA
Кең бейінді заманауи орта
- Қолданылуы
- Тұщы су цианобактериялары (соның ішінде токсигенді), жасыл, диатомды микробалдырлар, динофлагелляттар; ANACC коллекциясының стандарты
- pH
- 6,8–7,2
- Дереккөз
- Bolch & Blackburn, 1996
Құрамы
| Компонент | 1 л-ге мөлшері |
|---|---|
| NaNO₃ | 170 мг |
| K₂HPO₄ | 6,96 мг |
| MgSO₄·7H₂O | 49,4 мг |
| CaCl₂·2H₂O | 29,4 мг |
| NaHCO₃ | 16,9 мг |
| H₃BO₃ | 2,47 мг |
| Na₂SiO₃·9H₂O | 30 мг |
| MLA микроэлементтер ерітіндісі | 1,0 мл |
| Витаминдер ерітіндісі | 0,5 мл |
| Дистилденген су | 1000 мл-ге дейін |
MLA микроэлементтер ерітіндісі — жұмыс ерітіндісі
100 мл ерітіндіге · 1 л ортаға 1 мл шығыны · сақтау 4 °C, 12 ай
| Компонент | Өлшенді / көлемі |
|---|---|
| Na₂ЭДТА·2H₂O | 436 мг |
| FeCl₃·6H₂O | 315 мг |
| MnCl₂·4H₂O | 18,0 мг |
| № 2 бастапқы ерітінді (ZnSO₄) | 1 мл |
| № 3 бастапқы ерітінді (CoCl₂) | 1 мл |
| № 4 бастапқы ерітінді (CuSO₄) | 1 мл |
| № 5 бастапқы ерітінді (Na₂MoO₄) | 1 мл |
| № 6 бастапқы ерітінді (Na₂SeO₃) | 1 мл (қажет болғанда) |
| Дистилденген су | 100 мл-ге дейін |
f/2 микроэлементтерінің бастапқы ерітінділері (әрқайсысы бөлек дайындалады)
әрқайсысы 100 мл-ге · жұмыс ерітіндісінің 100 мл-іне әрқайсысынан 1 мл-ден алынады · сақтау 4 °C, 12 ай
| Компонент | Өлшенді / көлемі |
|---|---|
| № 1 — MnCl₂·4H₂O | 100 мл-ге 1,80 г |
| № 2 — ZnSO₄·7H₂O | 100 мл-ге 0,220 г |
| № 3 — CoCl₂·6H₂O | 100 мл-ге 0,100 г |
| № 4 — CuSO₄·5H₂O | 100 мл-ге 0,098 г |
| № 5 — Na₂MoO₄·2H₂O | 100 мл-ге 0,063 г |
Витаминдер ерітіндісі (f/2 стандартты рецептурасы) — жұмыс ерітіндісі
100 мл ерітіндіге · 1 л ортаға 0,5 мл шығыны · сақтау −20 °C, 1–2 мл аликвоталармен, 6 ай
| Компонент | Өлшенді / көлемі |
|---|---|
| Тиамин·HCl (витамин B₁) | 20 мг |
| Биотиннің бастапқы ерітіндісі | 1 мл |
| B₁₂ бастапқы ерітіндісі | 1 мл |
| Дистилденген су | 100 мл-ге дейін |
Витаминдердің бастапқы ерітінділері (бөлек дайындалады)
әрқайсысы 100 мл-ге · жұмыс ерітіндісінің 100 мл-іне әрқайсысынан 1 мл-ден алынады · сақтау −20 °C, 6 ай
| Компонент | Өлшенді / көлемі |
|---|---|
| Биотин (витамин H) | 100 мл-ге 10 мг |
| Цианокобаламин (витамин B₁₂) | 100 мл-ге 10 мг |
Дайындау
NaNO₃ еріту → K₂HPO₄ → MgSO₄·7H₂O → NaHCO₃ → H₃BO₃ → микроэлементтер ерітіндісінен 1 мл → CaCl₂·2H₂O → pH-ты түзету → соңғы болып Na₂SiO₃·9H₂O → автоклавтау → витаминдер ерітіндісінен 0,5 мл стерильді енгізу.
Ескертулер
- MLA тұщы су фитопланктонының кең спектріне арналған біртұтас орта ретінде әзірленген — бір коллекцияда әртүрлі жүйелік топтар сақталғанда ыңғайлы.
- MLA микроэлементтер ерітіндісіне арналған бастапқы ерітінділер f/2-дегімен бірдей; қосымша селениттің бастапқы ерітіндісі дайындалады (100 мл-ге Na₂SeO₃ 12,9 мг).
- Na₂SiO₃·9H₂O тек диатомды микробалдырларды өсіргенде енгізіледі.
- Құрамы бойынша f/2 жұмыс ерітіндісімен сәйкес келеді; жалғыз айырмашылығы — натрий селениті. № 6 бастапқы ерітінді: 100 мл-ге Na₂SeO₃ 12,9 мг. Селен динофлагелляттарға және алтын түсті микробалдырлардың бір бөлігіне қажет; жасыл микробалдырлар мен цианобактериялар үшін ол алынып тасталады.
- Бес ерітінді анық таңбаланған жеке құтыларда дайындалып, сақталады. Оларды жұмыс ерітіндісіне енгізгенге дейін бір-бірімен араластыруға болмайды.
- Витаминдерді автоклавтауға БОЛМАЙДЫ — тек 0,22 мкм мембрана арқылы стерильді сүзу. Тиамин 121 °C-та 40–70 %-ға ыдырайды және қыздырусыз да pH 8-ден жоғары болғанда деградацияға ұшырайды, сондықтан витаминдер суыған ортаға егу алдында бірден енгізіледі. Аликвоталарды қайта мұздатуға болмайды.
- Биотин суық суда нашар ериді — оны 1 мл 50 % этанолда немесе pH 8 болғанда жылы суда ерітеді, содан кейін көлемін жеткізеді. B₁₂ ерітіндісінің тән қызғылт-қызыл түсі болады; түссізденуі витаминнің ыдырағанын білдіреді.