← Назад
А. Среды для пресноводных цианобактерий
BG-11BG-11 (Blue-Green medium No. 11)
Базовая универсальная среда для цианобактерий
- Применение
- Synechocystis, Synechococcus, Anabaena, Nostoc, Oscillatoria, Microcystis; подходит и для многих зелёных микроводорослей
- pH
- 7,1 (после автоклавирования 7,4–7,6)
- Источник
- Rippka et al., 1979; Stanier et al., 1971; ATCC Medium 616; UTEX BG-11
Состав
| Компонент | Количество на 1 л |
|---|---|
| NaNO₃ | 1,5 г |
| K₂HPO₄·3H₂O | 0,04 г (или K₂HPO₄ безводн. 0,031 г) |
| MgSO₄·7H₂O | 0,075 г |
| CaCl₂·2H₂O | 0,036 г |
| Лимонная кислота (C₆H₈O₇) | 0,006 г |
| Цитрат железа-аммония | 0,006 г |
| Na₂ЭДТА (двунатриевая соль) | 0,001 г |
| Na₂CO₃ | 0,020 г |
| Раствор микроэлементов A5 + Co | 1,0 мл |
| Дистиллированная вода | до 1000 мл |
Раствор микроэлементов A5 + Co
на 100 мл раствора · расход 1 мл на 1 л среды (хватает на 100 л) · хранение 4 °C в тёмном стекле, 12 мес.
| Компонент | Навеска / объём |
|---|---|
| H₃BO₃ | 286 мг |
| MnCl₂·4H₂O | 181 мг |
| ZnSO₄·7H₂O | 22,2 мг |
| Na₂MoO₄·2H₂O | 39,0 мг |
| CuSO₄·5H₂O | 7,9 мг |
| Co(NO₃)₂·6H₂O | 4,94 мг (или 1 мл первичного р-ра 4,94 г/л) |
| Дистиллированная вода | до 100 мл |
Приготовление
Растворить NaNO₃ в 800 мл воды → внести K₂HPO₄ → MgSO₄·7H₂O → лимонную кислоту → цитрат железа-аммония → Na₂ЭДТА → Na₂CO₃ → 1 мл раствора A5 + Co → в последнюю очередь при интенсивном перемешивании добавить CaCl₂·2H₂O → довести до 1000 мл → скорректировать pH до 7,1 → автоклавировать 121 °C, 15 мин.
Примечания
- CaCl₂ вносится последним и только в разбавленный раствор: при добавлении к концентрированной смеси с фосфатом и карбонатом выпадает белая муть Ca₃(PO₄)₂ и CaCO₃, необратимо выводящая из среды фосфор и кальций.
- Молярные эквиваленты основных компонентов: NaNO₃ — 17,6 мМ; K₂HPO₄ — 0,18 мМ; MgSO₄ — 0,30 мМ; CaCl₂ — 0,24 мМ.
- Для твёрдой среды берут 10–15 г/л агара. Агар автоклавируют ОТДЕЛЬНО в двойном объёме воды, среду готовят двукратной концентрации и смешивают при 45–50 °C — совместное автоклавирование вызывает гидролиз агара и помутнение пластин.
- Для чашек добавляют 0,3 г/л Na₂S₂O₃·5H₂O: тиосульфат связывает продукты термического разложения агара, токсичные для цианобактерий, и заметно повышает всхожесть колоний.
- Соли растворяют по одной, в указанном порядке; H₃BO₃ растворяется медленно — допускается подогрев до 40 °C. Кобальт вносят из первичного раствора: навеску 4,94 мг взвесить на обычных весах невозможно. Первичный раствор Co: 494 мг Co(NO₃)₂·6H₂O в 100 мл воды, взять 1 мл. Без кобальта раствор называется просто «A5». Появление осадка или помутнения — признак негодности.